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II類生物安全柜(BSC)使用HEPA過濾,層流氣流,以提供操作者,環(huán)境和樣品的保護。出于無菌的目的,對于0.3微米大小的顆粒,HEPA過濾器的效率通常為99.99 +%。
典型的微生物程序通常利用本生燃燒器或其他明火來消毒和/或減少交叉污染; 但是,由于以下幾個原因,不建議在BSC內(nèi)使用這種明火:
II類BSC 通過在機柜的工作區(qū)域上傳遞向下層流氣流(以恒定速度單向行進的空氣,沒有湍流)來維持樣品保護。熱空氣上升,因此任何明火都會使空氣上升到層流下降,產(chǎn)生湍流并阻礙BSC保護工作區(qū)域樣品的能力。
如果明火變得太熱,它還具有熔化粘合劑的能力,該粘合劑將HEPA過濾介質(zhì)保持在其框架上。這破壞了HEPA過濾器的有效性,導致正壓通風系統(tǒng)中的安全殼損失。
如果火焰熄滅并且供氣閥保持打開,則可燃氣體將不受限制地引入機柜。在A2生物安全柜中,BSC中70%的空氣被再循環(huán)(見下面的視頻),可燃氣體的濃度可能達到爆炸性潛力,不僅對BSC,而且對用戶和實驗室構(gòu)成嚴重風險它占據(jù)了。
美國疾病控制和預防中心(CDC)和國家衛(wèi)生研究院(NIH)也在出版物中闡述了這一點:微生物和生物醫(yī)學實驗室的生物安全,第5版。,(BMBL 5th)。
在BSC中工作時,可以采取一些措施來減少材料交叉污染的可能性。打開的管子或瓶子不應(yīng)垂直放置。使用培養(yǎng)皿和組織培養(yǎng)板的研究人員應(yīng)將蓋子保持在開放的無菌表面上方,以大限度地減少向下空氣的直接沖擊。不應(yīng)將瓶蓋或管帽放在毛巾上。物品應(yīng)盡快重新蓋上或蓋好。 在生物安全柜的近乎無微生物的環(huán)境中不需要明火。在開放式工作臺上,燃燒培養(yǎng)容器的頸部將產(chǎn)生向上的氣流,防止微生物落入管或燒瓶中。然而,BSC中的明火產(chǎn)生湍流,破壞了供應(yīng)到工作表面的HEPA過濾空氣的模式。當認為必要時,可以使用配備有指示燈以按需提供火焰的觸摸板微型燃燒器。內(nèi)部機柜空氣擾動和熱量積累將小化。工作完成后必須關(guān)閉燃燒器。小型電動“爐”可用于凈化細菌環(huán)和針,并且優(yōu)于BSC內(nèi)的明火。應(yīng)盡可能使用一次性或可回收的無菌環(huán)。
如上面CDC所述,如果認為需要火焰,那么廣泛使用的設(shè)備類型是本生燈的更安全的替代品。其中一些采用低調(diào)的踏板減弱火焰; 其他人檢測運動。